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酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合不同分類
  • 發(fā)布日期:2023-02-27      瀏覽次數(shù):460
    • 根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才干的不同,又分為高結(jié)合力、中結(jié)合力和氨基化等。

      1、高結(jié)合力

      此種酶標(biāo)板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合才干大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ng IgG/cm2,首要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。運(yùn)用該類酶標(biāo)板可進(jìn)步敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發(fā)生非特異性反應(yīng)。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需運(yùn)用蛋白作為封閉劑。

      2、中結(jié)合力

      此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵與蛋白結(jié)合,適宜作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可下降潛在的非特異性穿插反應(yīng)。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

      ELISA試劑盒實驗

      3、氨基化

      ELISA試劑盒這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標(biāo)板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運(yùn)用適宜的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結(jié)合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,運(yùn)用的封閉液有必要可以與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所挑選的交聯(lián)劑中任何功用基團(tuán)發(fā)生作用。


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